Uwięzieni w więzieniu, w którym każdy pokój ma cztery drzwi, ale najwyraźniej nie ma wyjścia, gracze muszą spróbować znaleźć pokój 25, rzekome wyjście do tego koszmaru. Ale niektórzy z nich mogą być strażnikami więzienia, którzy czekają na odpowiedni moment. W grze kooperacyjnej Room 25 nie każdy chce uciec z więzienia - ale kto jest zdrajcą? W każdej turze ruchy gracza są zaprogramowane, co wymaga dyskusji, negocjacji - i ewentualnie zdrady.